Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
RGS8 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-403199
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RGS8 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico RGS8, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: RGS8 Antibody (F-3): sc-398949
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RGS8 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-403199 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
RGS8 (regolatore della segnalazione delle proteine G 8) è una proteina che attiva l’attività GTPasica e accelera la terminazione della segnalazione avviata dai GPCR promuovendo l’inattivazione della subunità Gα. Nelle cellule umane, RGS8 modula gli output dei secondi messaggeri, come le vie cAMP/PKA e PLCβ/Ca2+, plasmando ampiezza e durata delle risposte guidate dai recettori. È particolarmente espressa in contesti neuronali e contribuisce al controllo della segnalazione sinaptica e dell’eccitabilità di rete attraverso la regolazione di cascate accoppiate a Gi/o e Gq. Alterazioni dell’espressione o dell’attività di RGS8 sono state studiate in relazione a una neurotrasmissione disfunzionale e a fenotipi neuropsichiatrici, rendendola rilevante per studi meccanicistici sulla modulazione fine delle vie dei GPCR.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO RGS8 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene RGS8 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del RGS8 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto RGS8 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina RGS8.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di RGS8 per lo studio della segnalazione di RGS8, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni RGS8 critici per la funzione di RGS8
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di RGS8 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal RGS8 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal RGS8 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus RGS8. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal RGS8 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR RGS8 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia RGS8 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio RGS8 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.