Plásmido Doble Nickase (h) REPS1: sc-409347-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)REPS1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa REPS1 (h) y el plásmido de doble nickasa REPS1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a REPS1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) REPS1 | sc-409347-NIC | 20 µg | $410.00 |
REPS1 (proteína 1 con dominio Eps asociada a RALBP1) codifica una proteína adaptadora implicada en la endocitosis mediada por clatrina y en el tráfico de receptores mediante interacciones con RalBP1/RLIP76 y factores accesorios de la endocitosis. Al acoplar la señalización de pequeñas GTPasas con la formación de vesículas y la internalización de carga, REPS1 puede influir en vías posteriores que dependen de la disponibilidad regulada de receptores, incluidas las rutas de señalización de factores de crecimiento y de respuesta al estrés. Los procesos asociados a REPS1 se cruzan con la dinámica del citoesqueleto y la remodelación de membranas, lo que la vincula con la migración celular, la adhesión y la atenuación de señales. La desregulación de adaptadores endocíticos y de componentes de la vía de Ral se ha asociado con una señalización proliferativa alterada y fenotipos invasivos en biología del cáncer, lo que motiva estudios mecanísticos de la función de REPS1 en modelos de células humanas.
REPS1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus REPS1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de REPS1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de REPS1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con REPS1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.