Plásmido Doble Nickase (m) Relaxin 3: sc-431778-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Relaxin 3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Relaxin 3 (m) y el plásmido de doble nickasa Relaxin 3 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Rln3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Relaxin 3 | sc-431778-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) Relaxin 3 | sc-431778-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen murino **Rln3** codifica la **relaxina 3**, un neuropéptido secretado de la superfamilia de la insulina/relaxina que señaliza principalmente a través del **GPCR RXFP3** (y, según el contexto, **RXFP1/RXFP4**) para regular la excitabilidad neuronal y la integración neuroendocrina. La relaxina 3 se encuentra enriquecida en circuitos del tronco encefálico y del hipotálamo e influye en la conducta alimentaria, el estado de alerta, la respuesta al estrés y la salida autonómica mediante vías de GPCR acopladas a **cAMP/PKA** y programas transcripcionales posteriores. Las alteraciones en la señalización de relaxina 3 se han investigado en modelos de desregulación metabólica, fenotipos relacionados con la ansiedad y el estrés, y trastornos del ciclo sueño–vigilia, donde la modulación a nivel de circuitos afecta el balance energético y el estado conductual. Por ello, **Rln3** sirve como un punto de entrada molecular útil para estudiar la señalización de péptidos neuromoduladores y la función de redes hipotalámicas en sistemas de ratón.
Relaxin 3 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Rln3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Rln3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Rln3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Rln3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.