RBM7 Plasmide Double Nickase (h): sc-408808-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RBM7 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RBM7 Double Nickase Plasmid (h) e il RBM7 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RBM7. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RBM7 Plasmide Double Nickase (h) | sc-408808-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RBM7 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-408808-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RBM7 codifica una proteina legante l’RNA che funge da componente centrale del complesso NEXT (Nuclear Exosome Targeting), collegando il riconoscimento dell’RNA al reclutamento dell’esosoma dell’RNA per la degradazione di trascritti nucleari a vita breve e aberranti. Attraverso la regolazione dei prodotti della trascrizione pervasiva, dei trascritti a monte del promotore e degli RNA non codificanti, RBM7 contribuisce al controllo qualità dell’RNA, all’omeostasi trascrizionale e all’integrità del genoma. La sorveglianza dell’RNA dipendente da RBM7 si interseca con processi quali la trascrizione da parte dell’RNA polimerasi II, la maturazione dell’RNA e le risposte cellulari allo stress. Il metabolismo dell’RNA deregolato e le vie compromesse di degradazione dell’RNA nucleare a cui partecipa RBM7 sono rilevanti per studi meccanicistici su cancro e neurodegenerazione, in cui l’instabilità del trascrittoma è una caratteristica comune.
RBM7 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RBM7 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RBM7. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RBM7. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RBM7 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.