RBM14 Plasmide Double Nickase (h): sc-417972-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RBM14 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RBM14 Double Nickase Plasmid (h) e il RBM14 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RBM14. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: RBM14 Antibody (4E1): sc-517183
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RBM14 Plasmide Double Nickase (h) | sc-417972-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RBM14 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-417972-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RBM14 (RNA binding motif protein 14) è una proteina multifunzionale legante l’RNA che coordina, nel nucleo, la regolazione trascrizionale con il processamento dell’RNA. Partecipa a eventi associati allo spliceosoma, accoppiando lo splicing del pre‑mRNA con la trascrizione e influenzando programmi di espressione genica legati al controllo del ciclo cellulare e alle risposte allo stress. RBM14 si localizza anche nei corpi nucleari ed è stata implicata nell’organizzazione e nella dinamica dei granuli RNA–proteina, supportando la sorveglianza del genoma e il metabolismo dell’RNA. La disregolazione dell’espressione o della funzione di RBM14 è stata associata a splicing aberrante e a una deregolazione trascrizionale osservati in molteplici contesti rilevanti per il cancro e in altri disturbi che coinvolgono un processamento dell’RNA alterato.
RBM14 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RBM14 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RBM14. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RBM14. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RBM14 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.