RASA4B Plasmide Double Nickase (h): sc-418861-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RASA4B Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RASA4B Double Nickase Plasmid (h) e il RASA4B Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RASA4B. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RASA4B Plasmide Double Nickase (h) | sc-418861-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RASA4B Plasmide Double Nickase (h2) | sc-418861-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RASA4B codifica una proteina attivatrice della GTPasi di Ras (RasGAP) che favorisce la conversione di Ras-GTP attivo in Ras-GDP inattivo, agendo come regolatore negativo della segnalazione dipendente da Ras. Attenuando gli input a monte nelle cascate MAPK/ERK e PI3K-AKT, RASA4B contribuisce a modellare programmi cellulari che governano proliferazione, differenziamento e dinamiche di segnalazione in risposta allo stress. Un controllo deregolato della via di Ras è ampiamente implicato nella trasformazione oncogenica e in alterazioni della segnalazione immunitaria e infiammatoria, rendendo RASA4B un nodo utile per indagare la modulazione fine della via in modelli rilevanti per la malattia. Mappare la funzione di RASA4B può chiarire come ampiezza e durata del segnale di Ras influenzino gli output trascrizionali e le transizioni di stato cellulare.
RASA4B Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RASA4B nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RASA4B. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RASA4B. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RASA4B interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.