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Rad23B双切口酶质粒(h) | sc-402106-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rad23B双切口酶质粒(h2) | sc-402106-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 RAD23B 基因编码 Rad23B 蛋白。Rad23B 是一种泛素受体和 DNA 修复因子,可通过与 26S 蛋白酶体相互作用,将核苷酸切除修复(NER)与蛋白质稳态(proteostasis)耦联起来。Rad23B 参与识别和处理会导致 DNA 螺旋结构扭曲的损伤,并在紫外线及化学损伤后促进基因组维持;同时它还能通过结合已泛素化的底物,调节依赖泛素的降解过程。凭借这些功能,RAD23B 支持细胞对复制压力的应答,并参与影响细胞周期控制的 DNA 损伤信号通路。在实验模型中,涉及 RAD23B 的 NER 与泛素–蛋白酶体通路失调,已被关联到基因组稳定性改变以及与癌症相关的表型。
Rad23B 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 RAD23B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RAD23B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏RAD23B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了RAD23B基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。