RACK7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411774
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- RACK7 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico RACK7, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: RACK7 Anticuerpo (RF-9): sc-100824
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
RACK7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-411774 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
ZMYND8 (RACK7) codifica un lector de cromatina que se une a histonas acetiladas y metiladas mediante su módulo PHD–bromodominio–PWWP para coordinar la regulación transcripcional. RACK7 participa en la remodelación de la cromatina y en programas de respuesta al daño del ADN, integrando señales de modificaciones de histonas para modular la actividad de los potenciadores (enhancers) y la transcripción dependiente de la ARN polimerasa II. Se ha relacionado con la regulación de la transición epitelio-mesenquimal, con redes transcripcionales asociadas a hipoxia y con el control de la expresión de genes inflamatorios a través de interacciones con complejos correpresores y de remodelación. Se ha informado de desregulación de vías de cromatina asociadas a ZMYND8 en cáncer y otros trastornos caracterizados por alteraciones en la estabilidad del genoma y en el control transcripcional.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO RACK7 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ZMYND8 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ZMYND8 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ZMYND8 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RACK7.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ZMYND8 para la investigación de la señalización de RACK7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de ZMYND8 críticos para la función de RACK7
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ZMYND8 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido RACK7 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido RACK7 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ZMYND8. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RACK7 (h) y el plásmido HDR RACK7 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ZMYND8 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ZMYND8 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.