Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Rab GDI α/β Antibody (E-5): sc-374649. Western blot analysis of Rab GDI α/β expression in HeLa (A), NCI-H1299 (B), MCF7 (C), NIH/3T3 (D) and Neuro-2A (E) whole cell lysates.
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Rab GDI β CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-404136
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Rab GDI β CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Rab GDI β基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Rab GDI β: sc-515143，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Rab GDI β CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-404136 | 20 µg | $397.00 |
概述
GDI2 编码 Rab GDP 解离抑制因子 β（Rab GDI β），是一种细胞质调控蛋白，可与经异戊二烯化修饰的 Rab GTP 酶结合，并控制其在膜结构与细胞质之间的循环。通过调节 Rab 的定位及其可被激活的可用性，Rab GDI β 有助于协调囊泡出芽、系留与融合等关键步骤，这些步骤对内吞运输、回收通路以及高尔基体到内体的转运至关重要。Rab GDI β 功能受扰可能打破膜运输稳态，进而影响受体周转、信号的区室化以及细胞器动态。Rab GDI2 的表达或调控异常已在与癌症生物学和神经生物学相关的细胞表型研究中受到关注，因为在这些背景下囊泡运输与蛋白质稳态尤为关键。
Rab GDI β CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中GDI2基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对GDI2基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏GDI2开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Rab GDI β蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建GDI2缺失的细胞模型，用于Rab GDI β信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Rab GDI β 功能至关重要的 GDI2 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 GDI2 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Rab GDI β CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Rab GDI β CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 GDI2 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Rab GDI β HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Rab GDI β HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由GDI2同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定GDI2靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。