Rab 1A CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422550

개요

Rab1a는 ER-골지 간 수송과 골지 내 소포 수송을 조율하여 초기 분비 경로의 소포 수송을 조절하는 소형 GTPase인 Rab 1A를 암호화합니다. 여기에는 소포의 출아(budding), 결합(tethering), 융합(fusion) 과정이 포함됩니다. Rab 1A는 GTP 결합형과 GDP 결합형 상태를 오가며 골지체의 조직, 단백질 가공, 화물 전달에 영향을 미치는 효과기 복합체와 상호작용하고, 그 결과 단백질 항상성(proteostasis)과 세포소기관 항상성을 유지하는 데 기여합니다. Rab1a 의존적 수송은 막 공급과 구획 성숙을 조절함으로써 자가포식 및 리소좀 경로와도 연결됩니다. Rab1a 관련 수송의 조절 이상은 문헌에서 세포 스트레스 반응 및 신경퇴행과 종양성 신호전달 맥락과 관련된 표현형과 연관되는 것으로 보고되어 왔으며, 마우스 모델에서 막 수송 기반 질환 기전을 연구하는 데 유용한 노드로 간주됩니다.

Rab 1A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Rab1a 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Rab1a 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Rab1a의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Rab 1A 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Rab 1A 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Rab1a 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Rab 1A 기능에 중요한 Rab1a 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Rab1a 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Rab 1A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Rab 1A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Rab1a 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Rab 1A HDR 플라스미드 (m) 및 Rab 1A HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Rab1a 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Rab1a 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.