R-Spondin2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-433683

개요

Rspo2는 R-Spondin2를 암호화하는 유전자로, 분비성 매트리셀룰러 리간드이며 LGR 수용체에 결합하고 RNF43/ZNRF3에 의해 매개되는 Frizzled 수용체의 분해(턴오버)를 억제함으로써 정형(canonical) WNT/β-카테닌 신호전달을 증강합니다. 마우스 조직에서 R-Spondin2는 발생 패터닝, 줄기/전구세포 유지, 상피–간엽 간 신호전달에 기여하며, 기관형성, 조직 리모델링, 재생과 같은 과정에 영향을 미칩니다. 또한 그 활성은 WNT에 의해 구동되는 전사 프로그램과 세포외기질(ECM) 의존적 형태형성인자(morphogen) 농도 구배 등, 증식과 분화를 조절하는 경로들과 교차합니다. RSPO2–WNT 신호의 조절 이상은 비정상적인 조직 성장과 분화의 맥락에서 자주 연구되며, 발생 결함 및 종양성 경로 활성화 모델 등을 포함합니다.

R-Spondin2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Rspo2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Rspo2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Rspo2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 R-Spondin2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 R-Spondin2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Rspo2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• R-Spondin2 기능에 중요한 Rspo2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Rspo2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• R-Spondin2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 R-Spondin2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Rspo2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  R-Spondin2 HDR 플라스미드 (m) 및 R-Spondin2 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Rspo2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Rspo2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.