Ptx3 Plasmide Double Nickase (h): sc-402766-NIC

PTX3 codifica la pentraxina 3 (Ptx3), una molecola solubile di riconoscimento di pattern della famiglia delle pentraxine lunghe, che partecipa all’immunità innata umorale e al rimodellamento della matrice extracellulare. Ptx3 è rapidamente indotta da stimoli infiammatori come IL-1 e TNF e contribuisce alla regolazione del complemento interagendo con componenti quali C1q e il fattore H, modulando così l’opsonizzazione e l’amplificazione dell’infiammazione. Inoltre lega selettivamente ligandi microbici e proteine della matrice, collegando il riconoscimento dei patogeni alle risposte al danno tissutale, alla regolazione dell’angiogenesi e al reclutamento leucocitario. Un’espressione deregolata di PTX3 è stata associata a patologie infiammatorie, maggiore suscettibilità alle infezioni, patologia vascolare e infiammazione associata ai tumori, rendendolo un nodo utile per studiare la segnalazione dell’immunità innata e il crosstalk del microambiente.

Ptx3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PTX3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PTX3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PTX3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PTX3 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.