Progesterone Receptor Plasmide Double Nickase (h): sc-400198-NIC

PGR codifica il recettore umano del progesterone, un fattore di trascrizione nucleare attivato dal legando che regola programmi genici coinvolti nello sviluppo dei tessuti riproduttivi, nella decidualizzazione e nella proliferazione e differenziazione di cellule sensibili agli ormoni. Dopo il legame con il progesterone, PGR si associa agli elementi di risposta ormonale e a co-regolatori per modulare la cromatina e la trascrizione, intersecandosi inoltre con le vie MAPK/ERK e PI3K/AKT e con il crosstalk con la segnalazione del recettore degli estrogeni, contribuendo a plasmare le risposte del ciclo cellulare e dell’infiammazione. Alterazioni dell’espressione di PGR, dell’equilibrio tra isoforme o dell’output di segnalazione sono implicate nella biologia ormono-dipendente e vengono spesso studiate in contesti quali carcinoma mammario ed endometriale, endometriosi, fibromi uterini e infertilità. Queste caratteristiche rendono PGR un nodo centrale per lo studio delle reti trascrizionali dei recettori steroidei e della regolazione endocrina in modelli cellulari umani.

Progesterone Receptor Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PGR nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PGR. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PGR. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PGR interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.