Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Progesterone Receptor Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-422214
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Progesterone Receptor Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Progesterone Receptor, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Progesterone Receptor Antibody (A-2): sc-398898
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Progesterone Receptor Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-422214 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Pgr codifica il recettore murino del progesterone, un recettore nucleare per ormoni attivato dal legando che funge da fattore di trascrizione controllando i programmi genici a valle del progesterone. In seguito al legame con l’ormone, PGR forma dimeri, trasloca nel nucleo e regola l’accessibilità della cromatina e il reclutamento della RNA polimerasi II per coordinare la differenziazione dell’epitelio, la decidualizzazione, l’impianto e lo sviluppo della ghiandola mammaria. La segnalazione di PGR interagisce con le vie del recettore degli estrogeni, con le cascate MAPK/PI3K e con complessi di coregolatori per modulare finemente la progressione del ciclo cellulare, la modulazione immunitaria e il rimodellamento tissutale. Un’attività di Pgr deregolata o un’alterazione dell’equilibrio tra le isoforme recettoriali è ampiamente utilizzata come modello di fenotipi endocrini riproduttivi e di cambiamenti ormono-dipendenti rilevanti per la biologia uterina e la fisiologia mammaria.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Progesterone Receptor (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Pgr in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Pgr insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Pgr a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Progesterone Receptor.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Pgr per lo studio della segnalazione di Progesterone Receptor, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Pgr critici per la funzione di Progesterone Receptor
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Pgr per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Progesterone Receptor CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Progesterone Receptor CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Pgr. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Progesterone Receptor Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Progesterone Receptor (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Pgr per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Pgr definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.