PRMT3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406688

Panoramica

PRMT3 codifica una metiltransferasi di tipo I dell’arginina nelle proteine, che catalizza la dimetilazione asimmetrica di residui di arginina nei substrati proteici, contribuendo al controllo post-traduzionale delle interazioni proteina–proteina e del metabolismo dell’RNA. PRMT3 è localizzata prevalentemente nel citoplasma ed è stata collegata alla regolazione della biogenesi dei ribosomi e della traduzione, inclusa la metilazione di proteine ribosomali, influenzando così la proteostasi e i programmi di crescita cellulare. Attraverso il crosstalk con vie di segnalazione e di risposta allo stress, l’attività di PRMT3 può modulare indirettamente gli esiti dell’espressione genica tramite il controllo della traduzione e l’assemblaggio di complessi ribonucleoproteici. Una metilazione dell’arginina deregolata e alterazioni dell’attività della famiglia PRMT sono spesso associate a fenotipi legati al cancro e ad altri disturbi che coinvolgono un processamento anomalo dell’RNA e la sintesi proteica.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO PRMT3 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene PRMT3 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del PRMT3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto PRMT3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina PRMT3.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di PRMT3 per lo studio della segnalazione di PRMT3, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni PRMT3 critici per la funzione di PRMT3
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di PRMT3 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal PRMT3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal PRMT3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus PRMT3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal PRMT3 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR PRMT3 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia PRMT3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio PRMT3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.