PLAC8 Plasmide Double Nickase (m): sc-433072-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PLAC8 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PLAC8 Double Nickase Plasmid (m) e il PLAC8 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Plac8. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PLAC8 Plasmide Double Nickase (m) | sc-433072-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PLAC8 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-433072-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Plac8 codifica PLAC8, una piccola proteina ricca di cisteina identificata originariamente nel tessuto placentare e ampiamente espressa, nel topo, in contesti epiteliali e immuno-correlati. PLAC8 è stata collegata alla regolazione della differenziazione cellulare, delle risposte allo stress e di processi associati alla membrana, ed è stata riportata come in grado di influenzare programmi di segnalazione connessi all’immunità innata e al rimodellamento infiammatorio. Un’alterata espressione di PLAC8 è stata associata, in sistemi sperimentali, a cambiamenti nella proliferazione, nella migrazione e nell’adattamento metabolico, rendendola rilevante per la ricerca in biologia dei tumori, danno tissutale e interazioni ospite–patogeno. Nei modelli murini, Plac8 viene quindi spesso studiato come modulatore dipendente dal contesto dell’omeostasi epiteliale e della funzione delle cellule immunitarie.
PLAC8 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Plac8 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Plac8. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Plac8. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Plac8 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.