Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
phostensin Antibody (F-5): sc-365099. Western blot analysis of phostensin expression in MIA PaCa-2 whole cell lysate.
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phostensin CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-407125
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- phostensin CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在phostensin基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：phostensin: sc-376816，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
phostensin CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-407125 | 20 µg | $397.00 |
概述
PPP1R18 编码 phostensin，这是一种与肌动蛋白相关的调控性亚基，可帮助将蛋白磷酸酶 1（PP1）的活性定位到细胞皮质细胞骨架。通过将 PP1 偶联到丝状肌动蛋白，phostensin 参与调控肌动蛋白丝的动态变化、细胞形态以及依赖黏附的信号传导，从而进一步影响细胞运动能力和免疫细胞功能。这种对 PP1 的支架作用使 PPP1R18 与依赖磷酸化的重塑过程相联系，这些过程协调细胞骨架的组织以及膜近端信号复合物的构建。磷酸酶靶向与肌动蛋白重塑的失调，常与癌细胞迁移和侵袭表型，以及炎症和免疫相关过程密切相关。
phostensin CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中PPP1R18基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对PPP1R18基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏PPP1R18开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使phostensin蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建PPP1R18缺失的细胞模型，用于phostensin信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 phostensin 功能至关重要的 PPP1R18 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 PPP1R18 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 phostensin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 phostensin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 PPP1R18 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 phostensin HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 phostensin HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由PPP1R18同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定PPP1R18靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。