Le cellule A-431 trattate con EGF sono state processate utilizzando il sistema di purificazione delle proteine PhosphoCruzTM sc-24964. Fig. 1: I blot sono stati testati con l'anticorpo fosfotirosina, sc-508, per rilevare la tirosina fosforilata di EGFR. Lance A/B: frazioni di colonna non legate. Lance C/D: frazioni di colonna legate (arricchite di fosfoproteine). Lance E/F: lisati cellulari interi preparati da colture non trattate e trattate con EGF, rispettivamente. Fig. 2: Gli stessi campioni mostrati nella Fig. 1 sono stati analizzati con l'anticorpo anti-HSP 60, sc-13115.
Le cellule A-431 trattate con EGF sono state processate utilizzando il sistema di purificazione delle proteine PhosphoCruzTM sc-24964. Fig. 1: I blot sono stati testati con l'anticorpo fosfotirosina, sc-508, per rilevare la tirosina fosforilata di EGFR. Lance A/B: frazioni di colonna non legate. Lance C/D: frazioni di colonna legate (arricchite di fosfoproteine). Lance E/F: lisati cellulari interi preparati da colture non trattate e trattate con EGF, rispettivamente. Fig. 2: Gli stessi campioni mostrati nella Fig. 1 sono stati analizzati con l'anticorpo anti-HSP 60, sc-13115.
Le cellule A-431 trattate con EGF sono state processate utilizzando il sistema di purificazione delle proteine PhosphoCruzTM sc-24964. Fig. 1: I blot sono stati testati con l'anticorpo fosfotirosina, sc-508, per rilevare la tirosina fosforilata di EGFR. Lance A/B: frazioni di colonna non legate. Lance C/D: frazioni di colonna legate (arricchite di fosfoproteine). Lance E/F: lisati cellulari interi preparati da colture non trattate e trattate con EGF, rispettivamente. Fig. 2: Gli stessi campioni mostrati nella Fig. 1 sono stati analizzati con l'anticorpo anti-HSP 60, sc-13115.
PhosphoCruz™ Protein Purification System: sc-24964
affinity purification system devised to enrich/isolate phosphoproteins from cell lysates and tissue extracts for phosphorylation studies; proteins that carry a phosphate group are retained on the column while non-phosphorylated and undesired contaminants pass through
typical phosphoenriched protein yield is 5-10% of total protein
contains materials required for six individual phosphoprotein enrichment procedures including six single-use columns, 100 ml 2X Binding/Wash Buffer, 30 ml Eluting Buffer, 150 µl each Phosphatase Inhibitor Cocktails 1 and 2, and six ultrafiltration concentrators for concentrating phosphoenriched protein post-purification