PHF8 Plasmide Double Nickase (h): sc-407306-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PHF8 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PHF8 Double Nickase Plasmid (h) e il PHF8 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira PHF8. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PHF8 Plasmide Double Nickase (h) | sc-407306-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PHF8 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-407306-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PHF8 codifica una demetilasi delle lisine istoniche contenente un dominio JmjC, che rimuove preferenzialmente marcature repressive come H3K9me2/1 e può agire anche sugli stati di metilazione di H4K20, collegando il rimodellamento della cromatina al controllo trascrizionale. Attraverso il riconoscimento della metilazione di H3K4 mediato dal suo dito PHD, PHF8 viene reclutata sui promotori attivi, dove modula programmi di espressione genica dipendenti dall’RNA polimerasi II. PHF8 partecipa alla regolazione epigenetica della progressione del ciclo cellulare, della differenziazione neuronale e della dinamica della cromatina associata al danno al DNA. La deregolazione o le mutazioni di PHF8 sono state associate a fenotipi neuroevolutivi e a reti trascrizionali rilevanti per il cancro, rendendola un bersaglio utile per studiare la regolazione genica dipendente dalla cromatina.
PHF8 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PHF8 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PHF8. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PHF8. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PHF8 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.