Plasmide Double Nickase (h) Peroxin 26: sc-408486-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Peroxin 26 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Peroxin 26 Double Nickase (h) et le plasmide Peroxin 26 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PEX26. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Peroxin 26 Antibody (A-9): sc-376817
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Peroxin 26 | sc-408486-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **PEX26** code la **peroxine 26**, une protéine de membrane peroxysomale indispensable à la biogenèse des peroxysomes et au maintien de l’import des protéines de la matrice. PEX26 participe à la machinerie d’import des protéines peroxysomales en ancrant à la membrane le complexe de recyclage AAA ATPase (PEX1–PEX6), ce qui permet le renouvellement du récepteur PEX5 et soutient l’import des cargos PTS1/PTS2. Par ce rôle, PEX26 contribue aux voies du métabolisme lipidique centrées dans les peroxysomes, notamment la β‑oxydation des acides gras à très longue chaîne, la biosynthèse des éther‑phospholipides (plasmalogènes) et l’homéostasie des espèces réactives de l’oxygène. Des variants pathogènes de PEX26 sont associés à des troubles de la biogenèse des peroxysomes appartenant au spectre de Zellweger, faisant de PEX26 une cible majeure pour des études mécanistiques de la dysfonction des organites et des phénotypes de maladies métaboliques.
Peroxin 26 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PEX26 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PEX26. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PEX26. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PEX26.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.