PELP1 Plasmide Double Nickase (h): sc-405376-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PELP1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PELP1 Double Nickase Plasmid (h) e il PELP1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira PELP1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: PELP1 Antibody (E-1): sc-390599
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PELP1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405376-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PELP1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405376-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PELP1 (proteina 1 ricca di prolina, acido glutammico e leucina) è un coregolatore dei recettori nucleari che integra la segnalazione del recettore degli estrogeni e di altri recettori steroidei con il rimodellamento della cromatina e il controllo della trascrizione. Funziona da piattaforma (scaffold) per complessi che collegano l’espressione genica guidata dai recettori alla progressione del ciclo cellulare, alla biogenesi dei ribosomi e alle vie di risposta al danno al DNA, e può traslocare tra compartimenti nucleari e citoplasmatici per modulare la segnalazione delle chinasi. Attraverso queste interazioni, PELP1 contribuisce a programmi trascrizionali responsivi agli ormoni e a reti regolatorie più ampie che influenzano proliferazione, sopravvivenza e stabilità del genoma. Un’espressione o una localizzazione disregolate di PELP1 sono state associate ad alterazioni della segnalazione oncogenica e alla progressione in molteplici contesti tumorali, a supporto del suo impiego come bersaglio meccanicistico in studi focalizzati sulle vie di segnalazione.
PELP1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PELP1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PELP1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PELP1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PELP1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.