PARP-14 Plasmide Double Nickase (h): sc-402812-NIC

PARP14 (PARP-14/ARTD8) è una mono-ADP-ribosiltransferasi che regola l’ADP-ribosilazione delle proteine per modulare programmi trascrizionali, la trasduzione del segnale e processi associati alla cromatina. Interagisce con vie guidate dalle citochine, inclusa la segnalazione dipendente da STAT6, e può influenzare l’espressione di geni infiammatori, le risposte allo stress e la regolazione metabolica tramite le sue interazioni con fattori di trascrizione e proteine leganti l’RNA. L’attività di PARP-14 contribuisce alla differenziazione e alla polarizzazione delle cellule immunitarie, plasmando le risposte nell’infiammazione allergica e nei contesti di difesa dell’ospite. Un’espressione o una funzione disregolata di PARP14 è stata collegata ad alterazioni delle reti di segnalazione immunitaria ed è stata studiata in biologia del cancro per possibili ruoli nella segnalazione di sopravvivenza e nell’adattamento trascrizionale.

PARP-14 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PARP14 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PARP14. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PARP14. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PARP14 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.