Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
p57 Kip2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400444
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- p57 Kip2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico p57 Kip2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:p57 Kip2 Anticorpo (KP39): sc-56341
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
p57 Kip2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400444 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CDKN1C codifica a p57 Kip2, um inibidor de quinases dependentes de ciclina (CDK) da família CIP/KIP que restringe a atividade das CDKs para impor a parada do ciclo celular em G1 e sustentar a diferenciação terminal. p57 Kip2 integra sinais do desenvolvimento e do controle de crescimento por meio da regulação de complexos Ciclina–CDK e de conexões com checkpoints que coordenam a proliferação com a especificação de linhagem. O gene é submetido a imprinting e é sensível à dosagem, o que torna sua expressão rigidamente controlada na embriogênese, na biologia placentária e na homeostase tecidual. A desregulação de CDKN1C está associada a distúrbios de crescimento relacionados ao imprinting e tem sido investigada em contextos nos quais alterações no controle do ciclo celular e na diferenciação contribuem para fenótipos relevantes para doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO p57 Kip2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CDKN1C em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CDKN1C, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CDKN1C na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína p57 Kip2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CDKN1C para a investigação da sinalização de p57 Kip2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CDKN1C críticos para a função p57 Kip2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CDKN1C para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo p57 Kip2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo p57 Kip2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CDKN1C. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo p57 Kip2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR p57 Kip2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CDKN1C para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CDKN1C definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.