Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) p300: sc-435902-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)p300 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa p300 (m) y el plásmido de doble nickasa p300 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Ep300. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: p300 Anticuerpo (F-4): sc-48343
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) p300 | sc-435902-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) p300 | sc-435902-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen Ep300 del ratón codifica p300, una acetiltransferasa de lisina de acción amplia y coactivador transcripcional que acetila histonas y sustratos no histónicos para modular la accesibilidad de la cromatina y los programas de expresión génica. p300 integra señales de múltiples factores de transcripción y contribuye a la función de los potenciadores (enhancers), el control del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y la diferenciación específica de linaje. Mediante la modulación de redes transcripcionales dependientes de la acetilación, p300 influye en vías como las respuestas al estrés reguladas por p53, la señalización de TGF-β/SMAD y la regulación de genes inflamatorios. La actividad desregulada de EP300 se ha asociado con estados epigenéticos alterados y remodelación transcripcional observados en diversos contextos relevantes para la enfermedad, incluida la biología del cáncer, los trastornos del desarrollo y la disfunción inmunitaria.
p300 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Ep300 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Ep300. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Ep300. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Ep300 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.