Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
p19 INK4D/CDKN2D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401761
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- p19 INK4D/CDKN2D O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico p19 INK4D/CDKN2D, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:p19 INK4D/CDKN2D Anticorpo (DCS-100): sc-56334
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
p19 INK4D/CDKN2D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401761 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CDKN2D codifica a p19 INK4D, um membro da família INK4 de inibidores de quinases dependentes de ciclinas que restringe seletivamente a atividade de CDK4/6 para manter a RB1 em um estado hipofosforilado e limitar a progressão do ciclo celular na transição G1/S. Ao modular a sinalização ciclina D–CDK, a p19 INK4D contribui para o controle de checkpoints, o timing da proliferação e programas de diferenciação celular em múltiplos contextos teciduais. A perturbação dessa via é frequentemente associada à entrada desregulada no ciclo celular e a defeitos na manutenção do genoma, relevantes para a biologia do câncer e outros distúrbios proliferativos. Assim, CDKN2D é amplamente utilizado como um nó para dissecar a regulação do eixo CDK4/6–RB, estados do tipo senescência e o controle do crescimento responsivo ao estresse.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO p19 INK4D/CDKN2D (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CDKN2D em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CDKN2D, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CDKN2D na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína p19 INK4D/CDKN2D.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CDKN2D para a investigação da sinalização de p19 INK4D/CDKN2D, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CDKN2D críticos para a função p19 INK4D/CDKN2D
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CDKN2D para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo p19 INK4D/CDKN2D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo p19 INK4D/CDKN2D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CDKN2D. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo p19 INK4D/CDKN2D Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR p19 INK4D/CDKN2D (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CDKN2D para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CDKN2D definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.