OTUD5 Plasmide Double Nickase (h): sc-412550-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- OTUD5 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il OTUD5 Double Nickase Plasmid (h) e il OTUD5 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira OTUD5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
OTUD5 Plasmide Double Nickase (h) | sc-412550-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
OTUD5 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-412550-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
OTUD5 (conosciuto anche come DUBA) codifica un enzima deubiquitinante della famiglia OTU che scinde le catene di ubiquitina per regolare la stabilità delle proteine e l’intensità della segnalazione. Partecipa al controllo, dipendente dall’ubiquitina, delle vie dell’immunità innata e dell’infiammazione, inclusa la modulazione delle risposte all’interferone e di nodi di segnalazione associati a NF-κB. OTUD5 contribuisce inoltre alle risposte al danno del DNA e allo stress replicativo tramite “editing” dell’ubiquitina su substrati associati alla cromatina, influenzando i programmi di mantenimento del genoma. Un’attività o un’espressione deregolate di OTUD5 sono state collegate in letteratura a disfunzioni immunitarie e a rimodellamenti della segnalazione associati al cancro, rendendolo un bersaglio utile per studi meccanicistici dei circuiti dell’ubiquitina.
OTUD5 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus OTUD5 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di OTUD5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di OTUD5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con OTUD5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.