OTUD2 Plasmide Double Nickase (h): sc-406672-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- OTUD2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il OTUD2 Double Nickase Plasmid (h) e il OTUD2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira YOD1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
OTUD2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406672-NIC | 20 µg | $410.00 |
Lo YOD1 umano codifica l’enzima deubiquitinante OTUD2, una proteasi a cisteina con dominio OTU che modifica i segnali di ubiquitina per regolare la stabilità proteica e gli output di segnalazione. OTUD2 partecipa al controllo ubiquitina-dipendente della proteostasi e delle risposte allo stress, interfacciandosi con vie che governano la degradazione associata al reticolo endoplasmatico, la segnalazione infiammatoria e il rimodellamento dell’ubiquitina associato al danno al DNA. Modulando la cinetica e la specificità della rimozione delle catene di ubiquitina, OTUD2 può influenzare programmi trascrizionali, la progressione del ciclo cellulare e le soglie di apoptosi. La disregolazione delle vie di deubiquitinazione che coinvolgono OTUD2 è stata associata ad alterazioni della segnalazione immunitaria e a fenotipi oncogenici, motivando studi meccanicistici in biologia tumorale e infiammazione.
OTUD2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus YOD1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di YOD1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di YOD1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con YOD1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.