OMG Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406746

Panoramica

OMG (osteoglicina) codifica un piccolo proteoglicano secreto ricco di leucina che partecipa all’organizzazione della matrice extracellulare e alla fibrillogenesi del collagene, influenzando la biomeccanica dei tessuti e la segnalazione cellula–matrice. Modulando l’architettura della matrice, OMG può incidere sulle vie legate alle integrine e sulla disponibilità dei fattori di crescita che orientano i programmi di adesione, migrazione e differenziamento cellulare. Un rimodellamento alterato della matrice extracellulare che coinvolge OMG è stato studiato in contesti quali fibrosi, rimodellamento cardiovascolare e biologia del microambiente tumorale, dove la composizione stromale può influenzare fenotipi associati alla malattia. Queste caratteristiche rendono OMG un bersaglio utile per studiare come i componenti della matrice regolino il comportamento cellulare e la comunicazione intercellulare nei sistemi umani.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO OMG (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene OMG in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del OMG insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto OMG a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina OMG.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di OMG per lo studio della segnalazione di OMG, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni OMG critici per la funzione di OMG
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di OMG per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal OMG CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal OMG CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus OMG. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal OMG Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR OMG (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia OMG per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio OMG definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.