Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NSD2 Plasmide Double Nickase (h): sc-403274-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NSD2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NSD2 Double Nickase Plasmid (h) e il NSD2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira NSD2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: NSD2 Antibody (G-12): sc-365627
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NSD2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403274-NIC | 20 µg | $410.00 |
NSD2 (noto anche come WHSC1/MMSET) codifica una metiltransferasi della lisina degli istoni contenente il dominio SET, che catalizza principalmente la dimetilazione di H3K36, modellando l’accessibilità della cromatina e i programmi trascrizionali. Attraverso la regolazione degli stati epigenetici, NSD2 influenza le risposte al danno al DNA, la progressione del ciclo cellulare e l’espressione genica specifica di linea, con connessioni funzionali al rimodellamento della cromatina e al processamento dell’RNA. Un’attività alterata di NSD2 è implicata in una riprogrammazione trascrizionale oncogenica, inclusa una dis-regolazione ricorrente nelle neoplasie ematologiche e in altri tumori, ed è anche associata a sindromi dello sviluppo legate a una deregolarizzazione della cromatina. Queste caratteristiche rendono NSD2 un nodo utile per studiare la segnalazione dipendente dalla cromatina e i meccanismi di stabilità del genoma.
NSD2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NSD2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NSD2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NSD2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NSD2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.