NRIP3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-412715

Panoramica

NRIP3 (nuclear receptor interacting protein 3) codifica una proteina nucleare che, secondo quanto riportato, interagisce con il macchinario trascrizionale associato ai recettori nucleari, suggerendo un ruolo nella modulazione dei programmi di trascrizione che governano le decisioni sullo stato cellulare. Attraverso queste interazioni, NRIP3 è rilevante per reti di segnalazione collegate alla regolazione genica responsiva agli ormoni, a processi associati alla cromatina e al controllo, dipendente dal contesto, di proliferazione e differenziamento. Un’alterata regolazione delle vie dei recettori nucleari e dei co-regolatori trascrizionali è spesso implicata nel rimodellamento oncogenico della trascrizione e in altri fenotipi complessi di malattia, rendendo NRIP3 un bersaglio utile per studi meccanicistici della regolazione genica. L’analisi funzionale di NRIP3 può aiutare a definire come la trascrizione accoppiata ai recettori nucleari si integri con una più ampia segnalazione cellulare per plasmare l’espressione genica a valle.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO NRIP3 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene NRIP3 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del NRIP3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto NRIP3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina NRIP3.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di NRIP3 per lo studio della segnalazione di NRIP3, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni NRIP3 critici per la funzione di NRIP3
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di NRIP3 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal NRIP3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal NRIP3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus NRIP3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal NRIP3 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR NRIP3 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia NRIP3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio NRIP3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.