Nrf3 Plasmide Double Nickase (h): sc-404543-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Nrf3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Nrf3 Double Nickase Plasmid (h) e il Nrf3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira NFE2L3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Nrf3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404543-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Nrf3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404543-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NFE2L3 codifica il fattore di trascrizione bZIP della famiglia cap’n’collar Nrf3, un regolatore dell’espressione genica sensibile allo stato redox e dei programmi di proteostasi. Nrf3 partecipa alla segnalazione dello stress ossidativo e si interfaccia con processi associati al reticolo endoplasmatico (ER), incluso il controllo trascrizionale delle subunità del proteasoma che modellano il turnover proteico e l’adattamento cellulare. Nelle cellule umane, un’attività disregolata di Nrf3 è stata collegata ad alterazioni della proliferazione, della differenziazione e della tolleranza allo stress, rendendolo rilevante per studi di biologia tumorale e dei microambienti infiammatori. La connettività della sua via con le reti di risposta antiossidante e con la funzione ubiquitina–proteasoma supporta indagini meccanicistiche su come le cellule mantengano l’omeostasi sotto stress metabolico e genotossico.
Nrf3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NFE2L3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NFE2L3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NFE2L3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NFE2L3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.