Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
NQO1 Plasmide Double Nickase (m): sc-421913-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NQO1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NQO1 Double Nickase Plasmid (m) e il NQO1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Nqo1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: NQO1 Antibody (A180): sc-32793
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NQO1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-421913-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino Nqo1 codifica la NAD(P)H chinone deidrogenasi 1 (NQO1), una flavoproteina citosolica che catalizza la riduzione a due elettroni dei chinoni per limitare la formazione di semichinoni e la generazione di specie reattive dell’ossigeno. NQO1 è un enzima di detossificazione canonico inducibile dall’asse NRF2/KEAP1 e svolge un ruolo nell’omeostasi redox cellulare, nel metabolismo degli xenobiotici e nella protezione dai danni alle macromolecole indotti da elettrofili. Attraverso queste attività influenza le risposte allo stress ossidativo, la proteostasi e l’adattamento metabolico, risultando rilevante per studi su infiammazione, suscettibilità ai tossici e fenotipi associati allo stress in modelli murini. Le alterazioni dell’attività di NQO1 sono comunemente esaminate in contesti in cui lo squilibrio redox e lo stress chimico modificano la segnalazione e le vie di danno tissutale.
NQO1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Nqo1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Nqo1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Nqo1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Nqo1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.