NQO1 Plasmide Double Nickase (h): sc-400326-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NQO1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NQO1 Double Nickase Plasmid (h) e il NQO1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira NQO1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: NQO1 Antibody (A180): sc-32793
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NQO1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400326-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NQO1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400326-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NQO1 (NAD(P)H quinone deidrogenasi 1) è una flavoproteina citosolica che catalizza la riduzione a due elettroni dei chinoni in idrochinoni, limitando il redox cycling e la produzione di specie reattive dell’ossigeno. Agisce come un effettore chiave della risposta allo stress ossidativo NRF2/KEAP1 e contribuisce alla detossificazione cellulare, al mantenimento dell’omeostasi redox e alla protezione delle macromolecole dal danno elettrofilo. Attraverso il suo ruolo nel metabolismo degli xenobiotici e nelle difese antiossidanti, NQO1 influenza la suscettibilità cellulare al danno ossidativo e allo stress infiammatorio. Alterazioni dell’attività o dell’espressione di NQO1 sono state associate a variazioni della tolleranza allo stress e a fenotipi rilevanti per la malattia nella ricerca in oncologia, neurodegenerazione e disfunzioni cardiometaboliche.
NQO1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NQO1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NQO1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NQO1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NQO1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.