Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NPC1L1 Plasmide Double Nickase (h): sc-401741-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NPC1L1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NPC1L1 Double Nickase Plasmid (h) e il NPC1L1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira NPC1L1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: NPC1L1 Antibody (G-1): sc-166802
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NPC1L1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401741-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NPC1L1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401741-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NPC1L1 (Niemann-Pick C1-Like 1) è una proteina di membrana multipasso che media l’assorbimento cellulare del colesterolo e di altri steroli, collegando la disponibilità di lipidi nel lume al traffico intracellulare e alla regolazione metabolica. Nei tessuti umani, NPC1L1 sostiene l’assorbimento degli steroli e contribuisce al controllo omeostatico dei livelli di colesterolo attraverso interazioni coordinate con le vie di trasporto endocitico e le reti di gestione dei lipidi. La sua attività è funzionalmente collegata a percorsi che regolano il trasporto degli steroli, la composizione lipidica delle membrane e il metabolismo delle lipoproteine. La disregolazione dei processi associati a NPC1L1 è rilevante negli studi sull’ipercolesterolemia, sulla biologia del rischio di aterosclerosi e sui meccanismi delle malattie metaboliche.
NPC1L1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NPC1L1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NPC1L1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NPC1L1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NPC1L1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.