Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
NP60 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-428689-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NP60O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NP60 (m) e o Plasmídeo Double Nickase NP60 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Glyr1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NP60 Anticorpo (D-10): sc-390601
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NP60 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-428689-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NP60 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-428689-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O Glyr1 de camundongo codifica a NP60, uma proteína nuclear implicada na regulação da transcrição associada à cromatina e na manutenção do genoma. A NP60 tem sido associada a complexos modificadores de histonas e à coordenação de programas transcricionais com a progressão do ciclo celular, sustentando papéis no controle epigenético e nas respostas a danos no DNA. Por meio dessas funções, Glyr1/NP60 é estudada em vias que governam a diferenciação celular e a sinalização de estresse, nas quais a regulação alterada da cromatina pode contribuir para fenótipos relevantes para doenças. Sua localização nuclear e suas redes de interação a tornam um ponto útil para dissecar o acoplamento entre transcrição e cromatina em modelos de pesquisa biomédica.
NP60 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Glyr1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Glyr1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Glyr1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Glyr1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.