NLRC5 Plasmide Double Nickase (m): sc-436677-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NLRC5 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NLRC5 Double Nickase Plasmid (m) e il NLRC5 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Nlrc5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: NLRC5 Antibody (B-10): sc-515668
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NLRC5 Plasmide Double Nickase (m) | sc-436677-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NLRC5 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-436677-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Nlrc5 codifica NLRC5, un sensore citosolico della famiglia NLR che funge da regolatore trascrizionale chiave della presentazione dell’antigene tramite MHC di classe I, promuovendo l’espressione di H2-K/H2-D, della β2-microglobulina e di componenti del processamento dell’antigene. NLRC5 si integra nelle reti di segnalazione dell’immunità innata a valle delle vie dell’interferone e può modulare programmi trascrizionali infiammatori, collegando il riconoscimento dei patogeni all’innesco dell’immunità adattativa. Nei modelli murini, alterazioni dell’attività di Nlrc5 sono state associate a cambiamenti nella sorveglianza immunitaria, nella suscettibilità alle infezioni e nella regolazione delle interazioni tra tumore e sistema immunitario. Queste caratteristiche rendono NLRC5 un nodo utile per analizzare la dinamica della presentazione dell’antigene, i meccanismi di evasione immunitaria e l’espressione genica indotta dall’interferone in modelli cellulari pertinenti.
NLRC5 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Nlrc5 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Nlrc5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Nlrc5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Nlrc5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.