NKD2 Plasmide Double Nickase (h): sc-407988-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NKD2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NKD2 Double Nickase Plasmid (h) e il NKD2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira NKD2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NKD2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-407988-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NKD2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-407988-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NKD2 (Naked cuticle homolog 2) codifica una proteina citoplasmatica che funge da regolatore negativo della segnalazione canonica Wnt/β-catenina, interagendo con Dishevelled e modulando l’output della via. Attraverso questo ruolo, NKD2 influenza programmi trascrizionali dipendenti dalla β-catenina che controllano proliferazione e differenziamento cellulari, nonché l’omeostasi dei tessuti epiteliali. NKD2 è stata anche collegata a processi di traffico intracellulare e a meccanismi associati alla membrana che modellano la dinamica della segnalazione recettoriale. Alterazioni dell’espressione di NKD2 o dell’equilibrio della via sono spesso studiate nel contesto di fenotipi guidati da Wnt, rilevanti per la biologia del cancro, il rimodellamento epiteliale e le reti di segnalazione dello sviluppo.
NKD2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NKD2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NKD2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NKD2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NKD2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.