NKD1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406642

Panoramica

NKD1 (naked cuticle homolog 1) codifica un regolatore citoplasmatico a feedback della segnalazione Wnt/β-catenina, che si lega alle proteine Dishevelled per attenuare l’attivazione della via. Modulando i programmi trascrizionali dipendenti da β-catenina, NKD1 influenza le decisioni di destino cellulare, la differenziazione epiteliale e l’omeostasi tissutale. Un’espressione o una funzione alterata di NKD1 è stata associata a una segnalazione Wnt deregolata in contesti legati al cancro, includendo effetti su proliferazione, migrazione e firme trascrizionali guidate dalla via. In quanto modulatore della via Wnt, NKD1 è spesso studiato in modelli di segnalazione oncogenica, biologia dello sviluppo e regolazione delle cellule epiteliali.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO NKD1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene NKD1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del NKD1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto NKD1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina NKD1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di NKD1 per lo studio della segnalazione di NKD1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni NKD1 critici per la funzione di NKD1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di NKD1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal NKD1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal NKD1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus NKD1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal NKD1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR NKD1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia NKD1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio NKD1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.