Ninjurin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421898

概要

Ninj1は、神経損傷によって誘導される細胞表面の接着分子Ninjurin-1をコードしており、ニューロン、グリア、ならびに浸潤してくる免疫細胞の間の細胞間相互作用やコミュニケーションを調節します。Ninjurin-1は、軸索再生、白血球のトラフィッキング、炎症性シグナル伝達に関連するプロセスに関与し、NF-κB関連応答や骨髄系細胞の活性化との関連も報告されています。マウス系では、Ninj1の発現は組織損傷、神経炎症、マクロファージによるリモデリングといった文脈でしばしば研究されており、その制御が変化すると損傷応答に影響を及ぼし得ます。これらの特性により、Ninjurin-1は、神経系および末梢組織の病態生理において接着と炎症がどのように交差するかを解析するための有用な結節点となります。

Ninjurin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるNinj1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ninj1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ninj1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Ninjurin-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Ninjurin-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ninj1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Ninjurin-1の機能に不可欠なNinj1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ninj1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Ninjurin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびNinjurin-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ninj1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Ninjurin-1 HDRプラスミド（m）および Ninjurin-1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNinj1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNinj1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。