Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418958

Visão geral

Chrnb2 codifica a subunidade β2 dos receptores nicotínicos neuronais de acetilcolina (nAChRs), um canal catiônico pentamérico ativado por ligante que medeia a neurotransmissão colinérgica rápida. Os nAChRs contendo β2 regulam a despolarização da membrana e o influxo de Ca²⁺, moldando a plasticidade sináptica, a liberação de neurotransmissores e a excitabilidade dos circuitos em vias ligadas à atenção, à recompensa e ao estado de alerta. Por meio desses eventos de sinalização ionotrópica, o CHRNB2 influencia a expressão gênica dependente de atividade e processos a jusante associados a MAPK/CREB. Perturbações genéticas e funcionais dos nAChRs contendo β2 têm sido associadas a fenótipos neurocomportamentais e a mecanismos relacionados a crises epilépticas, tornando Chrnb2 um alvo relevante para modelar as contribuições colinérgicas à biologia de doenças neurológicas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Chrnb2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Chrnb2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Chrnb2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Chrnb2 para a investigação da sinalização de Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Chrnb2 críticos para a função Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Chrnb2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Chrnb2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Chrnb2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Chrnb2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.