Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
NF45 Plasmide Double Nickase (h): sc-402042-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NF45 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NF45 Double Nickase Plasmid (h) e il NF45 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ILF2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: NF45 Antibody (H-4): sc-365283
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NF45 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402042-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NF45 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402042-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ILF2 umano codifica NF45, un fattore legante RNA e DNA che forma un eterodimero funzionale con ILF3/NF90 per regolare la trascrizione, l’elaborazione dell’RNA, la stabilità dell’mRNA e la traduzione. NF45 partecipa alle risposte allo stress cellulare e a programmi di espressione genica associati al sistema immunitario, con ruoli riportati nel controllo della progressione del ciclo cellulare e nel mantenimento dell’integrità del genoma attraverso la sua influenza sul metabolismo degli acidi nucleici. Attraverso queste attività, ILF2/NF45 è spesso studiato in vie legate a proliferazione e apoptosi e la sua disregolazione è stata associata alla biologia tumorale e a risposte alterate allo stress genotossico. NF45 è inoltre esaminato nel contesto della segnalazione antivirale e infiammatoria, in cui è importante il controllo post-trascrizionale dei trascritti correlati alle citochine.
NF45 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ILF2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ILF2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ILF2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ILF2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.