neuroligin 2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-402250

Panoramica

NLGN2 codifica la neuroligina 2, una molecola di adesione cellulare postsinaptica arricchita nelle sinapsi inibitorie, dove si lega alle neurexine presinaptiche per organizzare la formazione e la maturazione sinaptica. La neuroligina 2 funge da impalcatura per la specializzazione postsinaptica GABAergica coordinando il clustering dei recettori, la segnalazione sinaptica e l’organizzazione del citoscheletro, influenzando l’equilibrio eccitazione–inibizione e la sincronia di rete. Attraverso il suo ruolo nella sinaptogenesi e nella plasticità sinaptica, NLGN2 si interseca con vie che regolano la connettività neuronale e la neurotrasmissione inibitoria. Alterazioni della funzione o dell’espressione di NLGN2 sono state implicate in fenotipi neuroevolutivi e neuropsichiatrici associati a uno sviluppo compromesso dei circuiti inibitori.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO neuroligin 2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene NLGN2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del NLGN2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto NLGN2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina neuroligin 2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di NLGN2 per lo studio della segnalazione di neuroligin 2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni NLGN2 critici per la funzione di neuroligin 2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di NLGN2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal neuroligin 2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal neuroligin 2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus NLGN2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal neuroligin 2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR neuroligin 2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia NLGN2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio NLGN2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.