Plásmido Doble Nickase (h) Neuregulin-1/NRG1: sc-400352-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Neuregulin-1/NRG1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Neuregulin-1/NRG1 (h) y el plásmido de doble nickasa Neuregulin-1/NRG1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a NRG1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Neuregulin-1/NRG1 Anticuerpo (E-12): sc-393006
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Neuregulin-1/NRG1 | sc-400352-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Neuregulin-1/NRG1 | sc-400352-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NRG1 codifica la neuregulina-1, un ligando tipo EGF anclado a la membrana y también secretado, que señaliza principalmente a través de las tirosina quinasas receptoras ERBB3/ERBB4 para activar las vías PI3K–AKT y MAPK/ERK. Regula el desarrollo neuronal y la plasticidad sináptica, las interacciones entre las células de Schwann y los axones durante la mielinización periférica, y el crecimiento y las respuestas al estrés de los cardiomiocitos. El empalme alternativo genera múltiples isoformas con dominios extracelulares y modos de señalización yuxtacrina o paracrina distintos, lo que permite un control específico del contexto de programas de diferenciación, migración y supervivencia. La desregulación de la señalización NRG1–ERBB se ha vinculado a fenotipos neuropsiquiátricos, alteraciones de la mielinización y remodelación de vías oncogénicas, lo que la convierte en una diana valiosa para estudios mecanísticos de comunicación celular y señalización por receptores.
Neuregulin-1/NRG1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus NRG1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de NRG1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de NRG1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con NRG1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.