Net CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405945

개요

ELK3(Net)는 MAPK/ERK 신호를 통합해 혈관신생, 세포 이동, 분화 등을 조절하는 맥락 의존적 유전자 발현 프로그램을 조절하는 ETS 계열 전사인자입니다. Net은 인산화 상태와 보조인자(cofactor) 모집 여부에 따라 전사 억제자 또는 활성자로 기능하며, 성장인자 신호를 즉각 초기(immediate-early) 유전자 및 혈관 관련 유전자 네트워크와 연결합니다. 내피세포의 행동과 상피–중간엽 가소성(EMT/MET)을 관장하는 경로를 조절함으로써, ELK3는 종양 진행, 저산소 관련 반응, 혈관 재형성 모델에서 자주 연구됩니다. ELK3 활성이 비정상적으로 조절될 경우 여러 암 맥락에서 침윤성 표현형 변화 및 비정상적 혈관신생 신호와 연관되는 것으로 보고되어, 종양성 전사 회로의 기전적 핵심 노드로 활용됩니다.

Net CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ELK3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ELK3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ELK3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Net 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Net 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ELK3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Net 기능에 중요한 ELK3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ELK3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Net CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Net CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ELK3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Net HDR 플라스미드 (h) 및 Net HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ELK3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ELK3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.