Nectin 2 Plasmide Double Nickase (m): sc-422541-NIC

Nectin2 (PVRL2/CD112) codifica per Nectina 2, una molecola di adesione cellulare della superfamiglia delle immunoglobuline concentrata nelle giunzioni aderenti, dove sostiene contatti cellula–cellula indipendenti dal Ca2+, la polarità epiteliale e l’architettura tissutale attraverso interazioni con afadina e il citoscheletro di actina. Coordinando l’assemblaggio e il rimodellamento delle giunzioni, Nectina 2 influenza processi quali la migrazione cellulare, la funzione di barriera e la segnalazione dipendente dal contatto. In ambito immunitario, Nectina 2 può fungere da ligando per recettori tra cui DNAM-1 (CD226) e TIGIT, collegando la sua espressione alla regolazione dell’interazione dei linfociti citotossici e della sorveglianza immunitaria. Un’espressione o una localizzazione disregolata di Nectina 2 è stata associata a fenotipi di adesione alterati e a meccanismi legati all’elusione immunitaria, studiati nella biologia del cancro e in contesti infiammatori.

Nectin 2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Nectin2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Nectin2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Nectin2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Nectin2 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.