NBR1 Plasmide Double Nickase (h): sc-402592-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NBR1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NBR1 Double Nickase Plasmid (h) e il NBR1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira NBR1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: NBR1 Antibody (4BR): sc-130380
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NBR1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402592-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NBR1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402592-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NBR1 (neighbor of BRCA1 gene 1) codifica un recettore selettivo dell’autofagia che collega il carico ubiquitinato all’autofagosoma tramite la sua regione di interazione con LC3 e i domini di legame per l’ubiquitina. Funziona insieme a recettori correlati come SQSTM1/p62 per sostenere la proteostasi, indirizzando aggregati proteici, organelli danneggiati e particelle invasive verso la degradazione lisosomiale. Attraverso ruoli nell’aggreofagia e nella pexofagia, NBR1 contribuisce alle risposte cellulari allo stress e interseca vie che regolano lo stress ossidativo e la segnalazione infiammatoria. Un’alterata eliminazione del carico dipendente da NBR1 è stata implicata in patologie caratterizzate da autofagia difettosa e controllo della qualità proteica compromesso, incluse la neurodegenerazione e l’adattamento allo stress associato al cancro.
NBR1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NBR1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NBR1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NBR1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NBR1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.