NALP10 Plasmide Double Nickase (m): sc-434050-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NALP10 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NALP10 Double Nickase Plasmid (m) e il NALP10 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Nlrp10. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NALP10 Plasmide Double Nickase (m) | sc-434050-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Nlrp10** codifica **NALP10 (NLRP10)**, un membro della famiglia dei recettori NOD-like implicato nella regolazione dell’immunità innata e nella segnalazione correlata agli inflammasomi. Sebbene NLRP10 sia privo di un dominio LRR canonico al C-terminale, è stato associato al controllo delle risposte infiammatorie attraverso la modulazione di vie legate a **NF-κB**, della produzione di citochine e delle funzioni di cellule mieloidi e dendritiche che plasmano l’immunità adattativa. L’attività di **Nlrp10** interseca reti di recettori di riconoscimento dei pattern che influenzano l’attivazione dei leucociti, la presentazione dell’antigene e l’omeostasi immunitaria mucosale. La disregolazione dei componenti delle vie NLR è ampiamente rilevante per i meccanismi delle malattie infiammatorie, rendendo **Nlrp10** un locus utile per studi meccanicistici della segnalazione immunitaria e della differenziazione delle cellule immunitarie in modelli murini.
NALP10 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Nlrp10 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Nlrp10. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Nlrp10. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Nlrp10 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.