MZF-1 Plasmide Double Nickase (h): sc-403142-NIC

MZF1 (myeloid zinc finger 1) codifica MZF-1, un fattore di trascrizione a dita di zinco C2H2 che si lega a elementi regolatori ricchi in GC per coordinare programmi di espressione genica coinvolti nella differenziazione ematopoietica, nel controllo del ciclo cellulare e nell’impegno di linea. Attraverso la modulazione di reti trascrizionali che governano proliferazione, apoptosi e maturazione mieloide, MZF-1 può influenzare processi quali il mantenimento di cellule staminali/progenitrici e la segnalazione responsiva allo stress. Un’alterata espressione o attività di MZF1 è stata associata a stati trascrizionali deregolati osservati nelle neoplasie ematologiche e in altri tumori, dove può incidere su invasività, sopravvivenza o firme geniche legate alla differenziazione. In quanto regolatore nucleare che si lega al DNA, MZF-1 è spesso studiato per mappare l’occupazione dei promotori, definire i circuiti trascrizionali e chiarire funzioni oncogeniche o oncosoppressive dipendenti dal contesto.

MZF-1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MZF1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MZF1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MZF1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MZF1 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.