Plasmide Double Nickase (h) MYH13: sc-400602-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MYH13 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MYH13 Double Nickase (h) et le plasmide MYH13 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MYH13. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MYH13 | sc-400602-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MYH13 | sc-400602-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MYH13 code la chaîne lourde de myosine 13, une protéine motrice spécifique des muscles squelettiques à contraction rapide, qui agit comme générateur de force dépendant de l’ATP au sein du sarcomère actine–myosine. En tant que composant central des filaments épais, MYH13 contribue à la cinétique de contraction musculaire, à l’organisation des myofibrilles et à la régulation des propriétés des fibres contractiles via le cycle des ponts actomyosine. Son profil d’expression l’associe à des voies impliquées dans la différenciation du muscle squelettique, l’assemblage du sarcomère et le couplage excitation–contraction. Des modifications de la composition en chaînes lourdes de myosine et un dysfonctionnement sarcomérique sont impliqués dans des phénotypes neuromusculaires et myopathiques, ce qui fait de MYH13 une cible pertinente pour étudier les mécanismes de la fonction musculaire et les défauts contractiles associés aux maladies.
MYH13 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MYH13 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MYH13. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MYH13. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MYH13.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.