MYCBP Plasmide Double Nickase (h): sc-404476-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MYCBP Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MYCBP Double Nickase Plasmid (h) e il MYCBP Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MYCBP. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: MYCBP Antibody (2E9): sc-517020
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MYCBP Plasmide Double Nickase (h) | sc-404476-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MYCBP Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404476-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MYCBP (proteina legante MYC) codifica un piccolo cofattore nucleare che si associa a MYC e modula programmi trascrizionali dipendenti da MYC che controllano crescita cellulare, metabolismo e proliferazione. Influenzando l’espressione genica guidata da MYC/MAX, MYCBP può incidere sulla regolazione trascrizionale mediata dalla RNA polimerasi II, sulla progressione del ciclo cellulare e sulle risposte allo stress cellulare. Un’alterata attività della via di MYC è una caratteristica comune di molti tumori, rendendo MYCBP un nodo utile per analizzare i circuiti regolatori centrati su MYC. La ricerca su MYCBP supporta inoltre lo studio dell’equilibrio dei co-regolatori trascrizionali e del controllo dipendente dal contesto delle reti di segnalazione oncogeniche.
MYCBP Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MYCBP nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MYCBP. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MYCBP. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MYCBP interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.